کلونینگ، بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب زیرواحد بتای هورمون tsh انسانی (tshβ) و ارزیابی آنتیژنیسیته آن

سابقه و هدف: اندازه گیری هورمون متحرک تیروئید (tsh) برای تشخیص و بررسی اختلالات تیروئیدی، بسیار مفید بوده و معمولا از آزمون های ria و elisa برای این منظور می شود. با توجه به اینکه زنجیره آلفا بین tsh و سه هورمون گلیکوپروتئینی lh, fsh و cg شباهت ساختمانی زیادی وجود دارد؛ بنابراین، در پژوهش حاضر سعی بر آن است که زیر واحد بتا tsh، تولید شده و از نظر آنتی ژنیسته مورد بررسی قرار می گیرد. مواد و روش ها: در این پژوهش تجربی، ژن tshβ​ انسانی به روش نوترکیب سنتز و مراحل کولینگ، بیان و تخلیص در باکتریe.coli) escherichia coli​) انجام شد. سپس، آنتی ژنیسیته پروتئین آن با تکنیک وسترن بلات (western blot)​ علیه آنتی بادی های ضد tsh​ منو نوکلئان حیوانی مورد بررسی قرار گرفت. یافتهها: ژن tshβ، به درستی در میزبان باکتریایی، کلون و بیان گردید و پروتئین خالص شده با آنتی بادی اختصاصی در تکنیک وسترن بلات واکنش نشان داد. استنتاج: پروتئین​ tshβ​ نوترکیب، با وجود داشتن تفاوت هایی مانند ساختار و شکل فضایی با پروتئین طبیعی​ آنتی ژنیسیته قابل قبولی داشت. از سوی دیگر، به نظر می رسد این پروتئین به دلیل داشتن اپی توپ های​ tsh​ بیشتر،​ قابلیت​ جایگزینشدن جهت استفاده در کیت های تشخیصی و غیره را برای افزایش اختصاصی شدن این آزمایش ها دارد.​